توضیحات

برخی ویژگی‌های این کیت عبارتند از:

قابلیت استخراج باکتری‌های گرم مثبت و گرم منفی از جمله مایکوباکتریوم‌ها.
حاوی Pre-Lysis Buffer می‌باشد که منجر به لیز بهتر نمونه‌های HPV و در نتیجه نمونه‌ی استخراج‌شده‌ی با کیفیت‌تر خواهد شد.
کیفیت بالای ستون‌های استخراج که باعث خلوص بهتر و غلظت بیشتر نمونه می‌شود.
دارای پروتئیناز K بسیار باکیفیت و لیوفیلیزه می‌باشد، بنابراین جهت انتقال، وابسته به دمای یخچال نیست و ماندگاری بالاتری دارد.

محتویات کیت:

دماي نگهداري	مقدار	مواد و اجزا
دماي محيط (۲۵ – ۱۵ درجه سانتيگراد)	۲۰ ml	Lysis Buffer I
	۲۰ ml	Lysis Buffer II
	۲۰ ml	Binding Buffer
	۵۰ ml	Wash Solution I^*
	۲ * ۱۰ ml	Wash Solution II^**
	۱۰ ml	Elution Buffer^***
	۲ * ۴۰ mg	Proteinase K^**** (Lyophilized)
	۲ * ۲ ml	Proteinase K Buffer^****
	۱۰۰ pcs	Columns & Collection Tube
	۳۰۰ pcs	Collection Tube

شرایط نگهداری:

تمام اجزای کیت بایستی در جای خشک و در دمای اتاق ( ۲۵ – ۱۵ درجه سانتيگراد( نگهداری شوند. در این کیت، پروتئیناز به صورت لیوفیلزه است که باعث می‌شود شرایط انتقال ساده‌تر و مطمئن‌تر باشد.

جهت آماده‌سازی پروتئیناز K، به هر ویال پروتئیناز لیوفیلیزه، محتویات یک ویال بافر پروتئیناز K اضافه شود. سپس جهت نگهداری می‌توان آن را در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد نگهداری کرد. در صورتی که شرایط نگهداری طبق دستورالعمل رعایت گردد، تمام اجزاء کیت تا پایان زمان انقضاء، پایدار می‌باشند.

موارد مصرف:

این کیت جهت استخراج DNA از نمونه‌های مختلف طراحی شده است و قادر است DNA را با غلظت و خلوص بالا از نمونه‌های زیر استخراج نماید:

انواع نمونه‌های بافتی نظیر نمونه‌های به‌دست‌آمده از زگیل تناسلی (Wart)، کبد، طحال، ریه و بافت‌های چربی
مایعات بدن نظیر ترشحات واژن، مایع منی (Semen) و سایر مایعات مخاطی
سلول‌‌های کشت داده‌شده
باکتری‌های گرم منفی و گرم مثبت
نمونه تازه و منجمد خون کامل، سرم و پلاسما که حاوی ضد انعقادهایی چون EDTA یا سیترات باشد
سواپ‌های دهانی

تجهیزات و موادی که باید توسط کاربر تهیه شوند:

اتانول
سرسمپلر
میکروتیوب ۲ میلی‌لیتر
ورتکس
سانتریفیوژ و میکروسانتریفیوژ
ترموبلاک یا بن ماری
لیزوزیم جهت نمونه‌های باکتری‌های گرم مثبت

مقدار نمونه‌های مورد نیاز:

µl 600-700 نمونه حاوی HPV (ترشحات واژن، Semen، سلول‌های کشت داده شده و ….)

توجه شود که استفاده از مقادیر بالاتر می‌تواند منجر به مهار واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز شود.

mg 25-50 از نمونه‌های بافت جانوری (کبد موش، شش، قلب، طحال و …) و نمونه‌های زگیل (جهت بررسی ویروس HPV)

جهت استفاده از نمونه‌های بافت جانوری و زگیل بایستی بافت مورد استفاده به قطعات کوچک تبدیل شود که به این منظور میتوان با کوبیدن بافت یا با استفاده از تیغ، بافت‌ را به قطعات کوچکتر و همگن تبدیل کرد، یا با استفاده از هاون و نیتروژن مایع، بافت را به صورت پودر درآورد. سپس نمونه‌های خرد‌‌شدهي بافت را در یک میکروتیوب ml 5/1 استریل قرار دهید.

µl 200 از نمونه خون پستانداران
۱۰^۸ الی ۱۰^۹ سلول باکتری گرم منفی و گرم مثبت کشت داده شده ( ml5)

در مورد باکتری گرم منفی، بایستی به صورت Overnight کشت داده شود و سپس محیط کشت حاوی باکتری به مدت ۵ دقیقه با دور RPM 7000 سانتریفیوژ شود. سپس محلول رویی را دور ریخته و به رسوب باقی‌مانده، µl ۱۵۰ محلول PBS 1x اضافه کرده و به خوبی پیپتاژ گردد تا کاملاً همگن شود.

Total DNA Extraction Kit, Uniqaz