CMV Pro Detection and Quantitation Kit, Uniqaz

کیت تشخیصی کمی CMV با متد Real-Time PCR(50rxn)

کیت حاضر جهت تشخیص اختصاصی DNA ویروس CMV در نمونه‌های پلاسما، سرم ، مایع مغزی-نخاعی (CSF)و خون کامل انسانی طراحی شده است که با تکنیک One step Real-Time PCR انجام می‌گردد. کنترل داخلی مورد استفاده در این کیت به‌صورت اندوژن می‌باشد.

این کیت دارای 5 استاندارد می‌باشد که امکان تعیین Load ویروس را با بالاترین دقت فراهم می‌کند دامنه‌ی تشخیص کیت CMV از 12Iu/ml تا 10⁷ Iu/ml می‌باشد

توضیحات

محتویات کیت باید در دمای -۲۰°C نگهداری شود.
از ذوب و انجماد مکرر کیت جدا خودداری گردد. ذوب و انجماد بیش از ۵ بار منجر به کاهش حساسیت محتویات کیت جهت ارزیابی نتایج می‌گردد. محتویات کیت بر روی یخ یا در دمای ۴°C ذوب گردد، بمدت ۵ ثانیه به آرامی ورتکس و سپس سریعا استفاده شود.
اجزای کیت تا زمان اتمام تاریخ انقضای کیت (در صورت نگهداری در دمای -۲۰°C) پایداری داشته و ماندگاری کیت از زمان تولید، بمدت ۱۲ ماه می‌باشد.

مرحله Real-Time PCR

جدول ۱- جزئیات مربوط به پروب‌های فلوئورسنت

تفسیر نتایج	IC TEXAS Red/ROX	CMV HEX
مثبت	+	+
منفی	+	–
فاقد اعتبار- تکرار استخراج DNAو انجام مجدد تست	–	–

جدول۲- اجزای واکنش

Volume(µl)	Reagent
۱۲.۵	Master Mix
۱.۲۵	Primer & Probe Mix
۱.۲۵	Nuclease Free Water
۱۰λ	DNA samples
۲۵	Total

ترجیحا از DNA تازه استخراج شده و یا ذخیره شده در شرایط مناسب، استفاده شود.
۲میکرولیتر از کنترل PTC زیر هود جداگانه با ۶میکرولیتر آب مقطر Nuclease Free ترکیب شود.

برنامه دمایی Real-Time PCR

جدول ۳. برنامه دمایی سیکل‌ها

Cycle	Quantitation	Time	Temp(°C)	Steps
Hold	Off	1min	۹۵	Initial Denaturation
۴۰	Off	۵ sec	۹۵	PCR and
	On	۳۰ sec	۵۶	Detection

پارامترهای موردنیاز در رسم منحنی استاندارد (Standard Curve)

Slop -۳ — -۳/۷

PCR efficieng % ۸۵ — %۱۱۵

R^z ۰/۹۵ – ۱

CMV Pro Detection and Quantitation Kit, Uniqaz